6B瓊脂糖微球(Bio-Sep 6B)
產(chǎn)品說明書
6B瓊脂糖微球是用6%濃度瓊脂糖制備成的球型顆粒，作為凝膠層析介質(zhì)使用。
1. 外觀
本品為乳白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。
2. 理化指標
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項 目 |
指 標 |
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基 質(zhì) |
6%瓊脂糖凝膠 |
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排阻極限 |
10000~4×106 (球蛋白) |
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形狀 |
球形 |
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粒徑 |
50~160μm |
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最高流速 |
14 cm/h* |
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耐壓 |
0.02 MPa |
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耐熱 |
pH7水中50℃24h |
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pH適用范圍 |
3~11(短時間，在位清洗),4~9 (長時間) |
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化學穩(wěn)定性 |
可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍 |
*檢測條件： 層析柱10mm×300mm *柱床高15cm,25℃, 流動相為0.1mol/LNaCl
3. 包裝
產(chǎn)品以聚胺酯瓶密封包裝，外貼標簽，注明“品名、體積、顆粒大小、保質(zhì)期、批號、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)單位及地址” 等內(nèi)容。
4. 貯存
產(chǎn)品應密封貯存在4℃~25℃（保存溶液為20% 乙醇），通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。
用過的柱子貯存在4℃（20% 乙醇）。
5. 注意事項
本品應避免與氧化劑接觸，避免長時間暴露在空氣中
6.運輸
運輸中應避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。
7.保質(zhì)期
暫定5年。
8.應用
本產(chǎn)品為傳統(tǒng)的瓊脂糖介質(zhì)，非特異性吸附低，回收率高，可多次重復使用等特點，用于分子量差異大、對分辨率要求不高的樣品的凝膠色譜純化。下面簡要介紹介質(zhì)的使用過程。
8.1 裝柱
凝膠過濾介質(zhì)的使用對裝柱的要求較高，為了保證分離效果，一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠，或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。
以下過程為通用介質(zhì)裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子，可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊，接好管路。
⑴讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
⑵選擇一根一定直徑的柱子，長約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠（約為柱床體積的1.15倍），清洗掉20%乙醇，抽干，用緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿。勻漿作脫氣處理。不要劇烈攪動，以免攪壞微球。
⑶將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務必使底端無氣泡。
⑷用玻璃棒引導勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
⑸ 打開蠕動泵，讓緩沖液緩慢流過，使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子，到柱床穩(wěn)定。
⑹最好用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平，上好柱頭。
8.2平衡
讓緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導和pH不變。
8.3上樣
⑴樣品用緩沖液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理，再上樣。
⑵介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的，分子量大的先流出來。
⑶上樣體積約為柱體積的1~2%，越小分離越好。
8.4洗脫
用緩沖液洗脫，洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
8.5再生
一般用緩沖液洗到平衡，可再次使用。 8.6注意：在裝柱、使用和保存柱子的時候，始終要避免柱子流干氣泡進入。 |
